Tất cả các kính hiển vi thường xuyên, tinh vi và được trang bị tốt không mang lại hình ảnh tuyệt vời do sử dụng không chính xác nguồn ánh sáng, thường dẫn đến chiếu sáng mẫu không đầy đủ. Khi được tối ưu hóa, sự chiếu sáng của mẫu vật phải sáng, không chiếu sáng và phân tán đồng đều trong lĩnh vực tầm nhìn.
Có rất nhiều nguồn ánh sáng có sẵn để chiếu sáng kính hiển vi, cả để quan sát thường xuyên và quang học quan trọng. Một nguồn ánh sáng phổ biến nhất, vì chi phí thấp và tuổi thọ dài, là đèn halogen vonfram 50 hoặc 100 watt như được minh họa ở đáy của sơ đồ kính hiển vi trong Hình 1, cũng mô tả chi tiết các con đường quang học trong kính hiển vi ánh sáng truyền hiện đại điển hình. Trong hình này, đèn vonfram-halogen phát ra một phổ liên tục của ánh sáng tập trung ở 3200 K (khi được đặt ở điện áp đèn +9 volt), sau đó được truyền qua ống kính thu thập và trường trước khi được phản xạ vào phần còn lại và vào mẫu vật. Hình ảnh hình thành các tia sáng được chụp bởi mục tiêu của kính hiển vi và được truyền vào thị kính hoặc được đạo diễn bởi một chùm tia vào một trong một số cổng camera. Trong suốt con đường quang học của kính hiển vi, ánh sáng được hướng và tập trung thông qua một loạt các cơ hoành và ống kính khi nó di chuyển từ nguồn để chiếu sáng mẫu vật và sau đó vào thị kính hoặc gắn camera. Sự liên kết của các thành phần quang học của kính hiển vi để tối ưu hóa sự chiếu sáng trong các kính hiển vi hiện đại được thực hiện theo các quy tắc chiếu sáng của Köhler. Thông tin chi tiết về cách cả hai kính hiển vi ánh sáng được truyền và phản xạ được căn chỉnh để chiếu sáng thích hợp được thảo luận trong các phần của chúng tôi về việc thiết lập một ánh sáng lightandrefredrefed của kính hiển vi. Các con đường quang được hiển thị ở trên trong Hình 1 là điển hình cho kính hiển vi ánh sáng truyền và liên quan đến một số ống kính, màng ngăn, gương và chùm tia để chiếu ánh sáng qua kính hiển vi.
Đèn vonfram-halogen tương đối sáng với phổ màu tập trung ở 3200 K (khi được đặt ở mức xấp xỉ +9 volt), nhưng yêu cầu các bộ lọc chuyển đổi màu để tăng nhiệt độ màu của chúng lên tương đương ánh sáng ban ngày. Một nguồn ánh sáng phổ biến khác là đèn xenon 75 đến 150 watt vì độ sáng rất cao và tuổi thọ dài, đầu ra tương đối thậm chí trên phổ thị giác và nhiệt độ màu gần đúng với yêu cầu của nhũ tương màng ban ngày. Khi cần có cường độ ánh sáng rất cao, đèn hố thiếc thường được sử dụng. Nội soi ảnh hưởng, đặc biệt cho mục đích chụp ảnh quang học quan trọng, đầu đốt thủy ngân 100 watt hoặc 200 watt thường được sử dụng. Trong những năm trước, đèn hồ quang carbon hoặc bóng đèn zirconium có thể đã được sử dụng, nhưng những nguồn này hiếm khi được nhìn thấy ngày nay. Để biết thêm thông tin và một cuộc thảo luận chi tiết về phổ rộng của đèn có sẵn để chiếu sáng kính hiển vi, hãy truy cập phần của chúng tôi trên các nguồn chiếu sáng cho kính hiển vi và quang học.
Sự liên kết của sự chiếu sáng nguồn thông qua các con đường quang học trong kính hiển vi ánh sáng phản xạ cũng là mối quan tâm chính, đặc biệt liên quan đến kim loại, kiểm tra wafer bán dẫn và tiến trình mới đáng chú ý được thực hiện trong kính hiển vi huỳnh quang. Kính hiển vi ánh sáng phản xạ cũng được chiếu sáng với nhiều nguồn ánh sáng (như đã thảo luận ở trên) và có thể được điều chỉnh để thực hiện tối ưu bằng cách sử dụng Köhler Illumination. Điều này được thảo luận chi tiết hơn trong phần của chúng tôi về cấu hình của Kính chiếu sáng Köhler cho kính hiển vi ánh sáng phản xạ. Các con đường chiếu sáng cho kính hiển vi ánh sáng phản xạ cũng là chủ đề của một số hướng dẫn Java tương tác bao gồm cả một hướng dẫn được liên kết ngay bên dưới.
Trong cuốn sách xuất sắc của mình "Nhiếp ảnh thông qua kính hiển vi", John Fellyargues rằng từ 80 đến 90 phần trăm của tất cả các máy quang kế được gửi đến các cuộc thi, triển lãm và các ấn phẩm khoa học là nạn nhân của các quang học phù hợp không đúng dẫn đến chiếu sáng mẫu kém. Đây là một trong những vấn đề phổ biến nhất với kính hiển vi và quang học nói chung, và một cuộc kiểm tra bất ngờ về kính hiển vi của sinh viên trong nhiều phòng thí nghiệm đại học sẽ tiết lộ sự phong phú của các thiết bị ngưng tụ và nguồn chiếu sáng được điều chỉnh kém. Chúng tôi nghi ngờ rằng sự liên kết và điều chỉnh không chính xác của cả thiết bị ngưng tụ và cơ hoành, trong toàn bộ phạm vi mục tiêu trong một kính hiển vi nhất định, là nguồn lỗi lớn nhất trong quang học.
Sự cần thiết cho sự chiếu sáng thích hợp không thể được nhấn mạnh quá mức. Tất cả quá thường xuyên, kính hiển vi $ 25, 000 được giảm xuống mức của một máy phóng đại bằng cách chiếu sáng và căn chỉnh không đúng cách, dẫn đến quang kế bị vượt qua bởi những người được sử dụng bằng kính hiển vi $ 2000 trong điều kiện tối ưu của K -hler chiếu sáng. Trong các phần đồng hành của mồi này liên quan đến lý thuyết về sự chiếu sáng của Köhler và việc thực hiện nó (cả Fortransmentedandreflectedlight), chúng tôi thảo luận về các khía cạnh quan trọng của cấu hình kính hiển vi và đã bao gồm một loạt
